近調(diào)諧時,為熒光標(biāo)記目的開發(fā)的熒光團(tuán)顯示高達(dá)倍的振動響應(yīng)的出色增強(qiáng)。結(jié)果是這種熒光探針可以通過CRS工藝在亞微米濃度下檢測到。這是重要的,因?yàn)樗_辟了在多標(biāo)簽樣品中映射不同探針的可能性,不同探針的數(shù)量受限于拉曼線的帶寬,而不是熒光的帶寬。由于檢測通道之間的串?dāng)_,在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標(biāo)記樣品具有挑戰(zhàn)性,而在共振增強(qiáng)SRS成像中,多探針標(biāo)記可以擴(kuò)展到數(shù)十個不同的探針。就多重成像而言,這種能力是一個巨大的勝利,因?yàn)樵S多細(xì)胞生物學(xué)研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細(xì)胞內(nèi)的過程和途徑。通過共振增強(qiáng)SRS提供的多路復(fù)用能力可以進(jìn)一步推動到更低的探針濃度。通過讓探針選擇性僅由SRS激發(fā)過程決定, ...
105。然而熒光顯微鏡技術(shù)可以捕捉到來自單個分子的信號,即使是敏感的CRS方法也需要成千上萬個目標(biāo)分子來產(chǎn)生可檢測的信號。因此,關(guān)注提高靈敏度是擴(kuò)大CRS技術(shù)使用的重要策略。CRS成像的對比度來源于分子化合物的振動特征。對于內(nèi)源性分子,這種標(biāo)記的數(shù)量是有限的。大量的物種和有限數(shù)量的振動特征的結(jié)合導(dǎo)致了重疊帶結(jié)構(gòu)的密集光譜。在這種背景下識別單個物種構(gòu)成了振動光譜學(xué)的基本挑戰(zhàn)。因此,提高CRS分子特異性的方法有機(jī)會使該技術(shù)得到更廣泛的應(yīng)用。上述這三個性能目標(biāo),高光譜成像速度,靈敏度和分子特異性,在過去十年中,已成為CRS顯微鏡領(lǐng)域發(fā)展的重要動力。更多詳情請聯(lián)系昊量光電/歡迎直接聯(lián)系昊量光電關(guān)于昊量 ...
相位和超分辨熒光雙模式顯微技術(shù)時應(yīng)用了這種技術(shù)。熒光顯微成像中,可獲取精細(xì)結(jié)構(gòu)的信息,但熒光標(biāo)記對實(shí)驗(yàn)體有破壞(光毒性、光漂白等)。無透鏡數(shù)字全息顯微技術(shù)不直接作用于實(shí)驗(yàn)體,有長時間無損檢測的可行性,與熒光顯微成像技術(shù)形成互補(bǔ)。以高老師、劉老師的研究工作為例,簡介結(jié)構(gòu)光照明顯微技術(shù)的實(shí)例。如上圖所示為基于數(shù)字微鏡陣列的高分辨率定量相位和超分辨熒光雙模式顯微技術(shù)的實(shí)驗(yàn)光路。結(jié)構(gòu)光照明顯微部分,應(yīng)用DMD作為反射式空間光調(diào)制器,DMD鏡面加載具有特定相位信息的條紋圖案。當(dāng)激光經(jīng)過DMD反射,獲得具有特定結(jié)構(gòu)的衍射光場。照射經(jīng)過L2、L3和MO1后在樣品上產(chǎn)生結(jié)構(gòu)化的條紋圖案。攜帶樣品信息的無關(guān)經(jīng)過 ...
為了減少來自熒光對拉曼信號的影響,人們可以使用長波長激光,但是相應(yīng)的拉曼信號會有所降低。目前,大多數(shù)拉曼成像是在700到900納米之間進(jìn)行的,在這個范圍內(nèi),可以發(fā)現(xiàn)自發(fā)熒光和拉曼信號之間的妥協(xié)。即便如此,需要很長的采集時間來檢測足夠的光子,并獲得可接受的信號噪聲。在快速系統(tǒng)中,獲取足夠的光子來測量單個拉曼光譜大約需要0.5秒,這意味著通過點(diǎn)掃描獲得一幅512 × 512像素的拉曼圖像需要36小時。為了克服這一限制,人們已經(jīng)開發(fā)了幾種拉曼成像模式和技術(shù),可分為兩種主要策略:提高成像采集速度和提高信號強(qiáng)度。在第①種策略中,對圖像采集設(shè)置進(jìn)行了修改,以提高成像采集速度,以便即使有低拉曼信號,也可以在 ...
于廣泛應(yīng)用于熒光顯微鏡的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人們追求的目標(biāo),盡管目前取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的開發(fā)仍然是該領(lǐng)域的熱點(diǎn)。與腈相比,炔標(biāo)記提供了兩倍以上的信號強(qiáng)度,并且根據(jù)炔在生物分子中的定位,其拉曼信號漂移——末端炔出現(xiàn)在約2100 cm?1處,內(nèi)部炔出現(xiàn)在約2200 cm?1處——如果選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)記定位組合,就可以對不同的炔標(biāo)記分子進(jìn)行多路成像。由于這些原因,炔標(biāo)記是目前應(yīng)用廣泛的拉曼標(biāo)記策略,并已被用于研究脂類、蛋白質(zhì)、糖和核苷酸。如果您對拉曼光譜成像有興趣,請?jiān)L問上海昊量光電的官方網(wǎng)頁:http://www.arouy.cn/thr ...
統(tǒng)的白熾燈、熒光燈等照明光源相比,具有光效高、使用壽命長、波長覆蓋范圍光、單色性能好、光色可調(diào)、節(jié)能、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。Lumencor的MAGMA Light Engine采用了現(xiàn)代固態(tài)照明技術(shù)來克服傳統(tǒng)光源的限制。在15厘米x 35厘米的緊湊尺寸內(nèi),MAGMA光引擎集成了21個單獨(dú)尋址的LED光源,波長范圍從365nm到1050nm,由板載微處理器控制。LED輸出被合并成一個公共的光學(xué)序列,指向前面板上的光輸出口。通過調(diào)整LED陣列21個元件的相對輸出強(qiáng)度可以合成用戶所需要的光譜分布,例如AM1.5G太陽光譜。如果您對Lumencor光源有興趣,請?jiān)L問上海昊量光電的官方網(wǎng)頁:https://ww ...
劣勢,那就是熒光效應(yīng)。物體受到光照射可能會吸收光子能量,從而放射出能級小于入射光波長的光,UV-VIS波段這種情況較為明顯。因此,對于許多材料而言,受到UV-VIS范圍內(nèi)的照射,容易產(chǎn)生熒光,而大量的熒光背景,則可能掩蓋住本來希望采集的拉曼信號。如果來到深紫外光范圍內(nèi),則能夠有效避免熒光影響,因?yàn)楦痰腢V光激發(fā)出的熒光通常在300nm以上,可以與拉曼信號進(jìn)行有效的分辨。但是紫外光的劣勢也很明顯,那就是能量較高,容易損壞材料,而其價(jià)格和制造難度也相對較高。綜上,對于拉曼應(yīng)用的激光器選擇,需要綜合考慮拉曼信號強(qiáng)度,分辨率,材料強(qiáng)度,光源價(jià)格等一系列因素。法國Oxxius公司提供紫外-近紅外全波段 ...
使用激光誘導(dǎo)熒光來進(jìn)行空間映射。每種化學(xué)物質(zhì),即每種分子,都有獨(dú)特的原子和原子間鍵的排列方式。這些鍵的振動能態(tài)對應(yīng)于紅外光的光子能量。因此,每種分子物種在病毒的紅外光譜中都有獨(dú)特的共振峰模式。每一種化學(xué)物質(zhì),即每一種分子,都有獨(dú)特的原子和原子間鍵的排列方式。這些鍵的振動能態(tài)對應(yīng)于紅外光的光子能量。因此,每個分子種類在其紅外光譜中都有獨(dú)特的共振峰模式。這就是為什么紅外吸收,通常以傅里葉變換紅外的形式,是化學(xué)和生物化學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室中最常用的分析工具之一。但是紅外光僅限于與亞分子鍵相對應(yīng)的較大振動能量。為了探測晶體聲子模式或檢測與這些材料結(jié)構(gòu)性質(zhì)變化相關(guān)的一些其他構(gòu)象變化,所需的頻率擴(kuò)展到太赫茲范圍, ...
鏡光源對兩種熒光染料進(jìn)行激發(fā),用于顯示Bleedthrough和crosstalk的不同表現(xiàn)以及不同的解決方案。圖1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激發(fā),485/25濾光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四帶通多邊分束器和發(fā)射濾光片在這幅圖像中同時存在bleedthrough和crosstalk現(xiàn)象。Bleedthrough表現(xiàn)為圖像中細(xì)胞外灰度相對較高(對比圖2,已消除bleedthrough的情況)。圖2.SPECTRA X 光引擎青色光通道激發(fā),475/28濾光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四帶通多邊分束器和發(fā)射濾光片通過改變 ...
樣品和背景的熒光,也受到微弱信號和瑞利散射的限制。在這些技術(shù)中,拉曼光譜適合用于遙感探測爆炸物。每種炸藥分子都有其獨(dú)特的拉曼光譜特征。根據(jù)這些獨(dú)特的特性,可以發(fā)展對峙拉曼光譜技術(shù),利用拉曼數(shù)據(jù)庫對爆炸物進(jìn)行識別。常用炸藥有TNT, HMX, PETN, RDX, AN, TA TB等,但需要注意的是,同一爆炸物在不同探測系統(tǒng)、校準(zhǔn)方法、系統(tǒng)誤差或數(shù)據(jù)處理算法之間的拉曼頻移是不同的。隔離拉曼光譜較早應(yīng)用于炸藥的探測,它還廣泛應(yīng)用于文物探測、礦產(chǎn)勘查、行星表面物質(zhì)勘查等領(lǐng)域。隔離拉曼系統(tǒng)由受激激光器、發(fā)射和收集路徑、光譜儀、ICCD(強(qiáng)化電荷耦合裝置)和控制系統(tǒng)組成。激光照射爆炸材料,受激拉曼散射 ...
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