短脈沖光進(jìn)行激發(fā)(相對(duì)于樣品的壽命較短)，然后直接(即通過(guò)門控檢測(cè)或脈沖采樣)或使用時(shí)間分辨電子技術(shù)記錄熒光分子的指數(shù)衰減如圖1(a)及1(b)。另外，頻域技術(shù)也可以測(cè)量熒光壽命如圖1(c)和1(d)。這里，激勵(lì)是連續(xù)的，隨著時(shí)間的推移，振幅調(diào)制為正弦波。熒光信號(hào)的相位和振幅隨激發(fā)波的變化而變化。通過(guò)繪制在一定調(diào)制頻率范圍內(nèi)的相位變化，可以看到熒光團(tuán)的相位延遲和振幅調(diào)制如圖1(d)。得到的熒光正弦信號(hào)可以在頻域解調(diào)，以量化熒光強(qiáng)度指數(shù)衰減引起的延遲。圖1FLIM常見(jiàn)的實(shí)現(xiàn)是使用一種稱為TCSPC的快速電子方法如圖1(a)。在TCSPC中，一個(gè)快速秒表測(cè)量一個(gè)激發(fā)光子和發(fā)射光子。這個(gè)時(shí)間定義了每 ...

拉曼顯微鏡的激發(fā)需要(至少)兩個(gè)激光波長(zhǎng)，其中一個(gè)波長(zhǎng)必須是可調(diào)的，以匹配分子振動(dòng)頻率的差頻。此外已經(jīng)證明，用幾皮秒的激光脈沖寬度激發(fā)CARS和SRS可以理想地平衡高效生成非線性信號(hào)所需的高峰值功率與相對(duì)狹窄的光譜帶寬(<1 nm)的要求，以匹配分子振動(dòng)的固有線寬。對(duì)于高速成像，至少需要10Mhz的重復(fù)頻率，理想情況下應(yīng)該更高。這是因?yàn)樵谝曨l速率成像中，數(shù)據(jù)是以每秒1000萬(wàn)像素的速度獲取的，并且CARS至少需要每個(gè)像素發(fā)射一個(gè)激光(對(duì)于帶有調(diào)制傳輸檢測(cè)的SRS至少需要兩個(gè)激光)。此外，近紅外光譜區(qū)域的激光激發(fā)已被證明能較大限度地減少CARS中非共振背景的產(chǎn)生，與可見(jiàn)光激發(fā)相比，提供了減 ...

在短時(shí)間內(nèi)被激發(fā)到更高的能級(jí)。電子將經(jīng)歷振動(dòng)弛豫到激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)水平(記為S1)，這是一種稱為內(nèi)轉(zhuǎn)換的非輻射過(guò)程。從S1電子態(tài)，分子通過(guò)輻射或非輻射過(guò)程回到基態(tài)。圖1表示了在這些能級(jí)中發(fā)生的不同發(fā)光現(xiàn)象。熒光是分子(熒光團(tuán))通過(guò)發(fā)射可檢測(cè)的光子(時(shí)間尺度為)衰減到基態(tài)的輻射過(guò)程。熒光發(fā)射發(fā)生在激發(fā)電子能級(jí)最低的位置(S1)。這種來(lái)自最低激發(fā)電子能級(jí)的強(qiáng)制發(fā)射確保了發(fā)射光譜保持不變，并且與激發(fā)波長(zhǎng)無(wú)關(guān)。由于振動(dòng)弛豫和內(nèi)部轉(zhuǎn)換中的能量損失，發(fā)射的熒光光子的能量較低(即發(fā)射發(fā)生在比激發(fā)更長(zhǎng)的波長(zhǎng))。這種發(fā)射波長(zhǎng)的位移稱為斯托克斯位移。另一個(gè)主要發(fā)光過(guò)程，磷光，通過(guò)被稱為系統(tǒng)間交叉(ISC)的過(guò)程發(fā) ...

光分子因?yàn)槭?span style="color:red;">激發(fā)射而產(chǎn)生熒光信號(hào)，接著繼續(xù)照射使這些發(fā)光的熒光分子產(chǎn)生漂白， 在下一輪不能被激發(fā)光再次激活。之后交替使用405nm和561nm激光來(lái)進(jìn)行激活，激發(fā)和漂白其他的熒光分子。往復(fù)循環(huán)，直至全部完成稀疏標(biāo)記的細(xì)胞成像。圖1展示了使用光激活定位顯微技術(shù)PALM 定位單個(gè)熒光分子最后實(shí)現(xiàn)超光學(xué)衍射極限分辨率成像的示意圖。PALM的成像方法只能觀察基于細(xì)胞外源表達(dá)的蛋白質(zhì)。圖1.PALM超分辨率顯微成像系統(tǒng)原理及示意圖PALM超分辨系統(tǒng)系統(tǒng)部分組成及光路結(jié)構(gòu)：（1）倒置熒光顯微鏡：可以用于激光掃描共焦顯微成像或者單分子PALM顯微成像。（2）半導(dǎo)體激光：405nm激光器作為激活光，561nm ...

，由于相干受激發(fā)射過(guò)程[1]能產(chǎn)生約103-105倍的增強(qiáng)拉曼信號(hào)，可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)視頻速率(約25幀/s)[2]的高速成像。SRS顯微鏡繼承了自發(fā)拉曼光譜的優(yōu)點(diǎn), 是一種能夠快速開發(fā)、label-free的成像技術(shù)，同時(shí)具有高靈敏度和化學(xué)特異性[3-6], 在許多生物醫(yī)學(xué)研究的分支顯示出應(yīng)用潛力,包括細(xì)胞生物學(xué)、脂質(zhì)代謝、微生物學(xué)、腫瘤檢測(cè)、蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊和制藥[7-11]。特別的是，SRS在對(duì)新鮮手術(shù)組織和術(shù)中診斷的快速組織病理學(xué)方面表現(xiàn)出色，與傳統(tǒng)的H&E染色幾乎完全一致[12,13]。此外，SRS能夠根據(jù)每個(gè)物種的光譜信息，對(duì)多種組分的混合物進(jìn)行定量化學(xué)分析[6,7,14]。盡管在 ...

可重復(fù)的單擊激發(fā)·內(nèi)部傳感器評(píng)估和過(guò)程控制·自動(dòng)搜索和調(diào)整沖擊力·位置的變化是自動(dòng)預(yù)測(cè)的·通過(guò)附件配置脈沖特性·通過(guò)遠(yuǎn)程控制或集成到客戶系統(tǒng)中來(lái)觸發(fā)功能·在德國(guó)設(shè)計(jì)和組裝·CE認(rèn)證1.確保單次激發(fā)雙重撞擊激勵(lì)可以在時(shí)域和頻域檢測(cè)到2.豐富的配件支持不同的傳感器-尖端-配重的組合。綜述上文介紹WaveHitMAX - 一款用于全自動(dòng)沖擊測(cè)試的智能脈沖錘，在全新的AI智能脈沖領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)真正意義上的全自動(dòng)智能脈沖錘！關(guān)于Gfai techGfai tech GmbH一直在生產(chǎn)和銷售"德國(guó)制造"的聲音和振動(dòng)測(cè)量和分析創(chuàng)新產(chǎn)品超過(guò)15年。作為應(yīng)用計(jì)算機(jī)科學(xué)促進(jìn)會(huì)（GFai）的100%子 ...

下。通過(guò)增加激發(fā)光的強(qiáng)度來(lái)增加熒光燈的數(shù)量是不可行的，因?yàn)檫@會(huì)傷害魚類。圖2 HiCAM高速像增強(qiáng)熒光相機(jī)附在熒光顯微鏡上實(shí)驗(yàn)裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統(tǒng)的熒光顯微鏡對(duì)斑馬魚進(jìn)行研究(圖2)。將魚固定在凝膠中，從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細(xì)胞中發(fā)出。這種光向各個(gè)方向發(fā)射，其中一些光以相反的方向穿過(guò)激光的光路。但是，熒光通過(guò)二色鏡被定向到相機(jī)上，而不是被反射回光源。任何散射的激發(fā)光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光，只透射紅細(xì)胞熒光發(fā)出波長(zhǎng)的光。圖像傳感器將捕捉進(jìn)來(lái)的熒光。捕捉將以每秒數(shù)百或數(shù)千幀的幀率下進(jìn)行，每幀的曝光時(shí)間數(shù)量級(jí)在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子 ...

體中載流子的激發(fā)和復(fù)合等。正是由于這個(gè)緣故，在飛秒激光誕生后的相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，飛秒激光主要是用來(lái)研究物理、化學(xué)領(lǐng)域微觀過(guò)程超快現(xiàn)象的一個(gè)技術(shù)，從而在物理、化學(xué)和生物領(lǐng)域完成了大量的超快過(guò)程的研究，發(fā)現(xiàn)了大量的新的超快現(xiàn)象，解釋了大量原子、分子微觀運(yùn)動(dòng)規(guī)律，成為多個(gè)基礎(chǔ)學(xué)科研究領(lǐng)域中相當(dāng)引人矚目并獲得累累成果的研究方向。二、飛秒激光的功率飛秒激光的峰值功率是指脈沖持續(xù)時(shí)間內(nèi)所具有的瞬時(shí)功率，即E/r，E為飛秒脈沖包絡(luò)內(nèi)所攜帶的能量，r為飛秒脈沖包絡(luò)的j大值一半所應(yīng)對(duì)的時(shí)間寬度。由于r為極短的10-15s量級(jí)，即使其攜帶的能量為毫焦耳量級(jí)（10-3J）,其峰值功率也高達(dá)1012W(TW，太瓦) ...

）激光器進(jìn)行激發(fā)。由于可見(jiàn)或近紅外激光器的波長(zhǎng)更短，拉曼顯微鏡的空間分辨率可以達(dá)到亞微米級(jí)。另一方面，紅外光的波長(zhǎng)為幾微米。對(duì)于許多顯微鏡的應(yīng)用來(lái)說(shuō)，其空間分辨率被認(rèn)為是很差的。2）水在紅外區(qū)域有強(qiáng)烈的吸收。對(duì)于富含水的環(huán)境（如生物樣品），紅外光會(huì)受到強(qiáng)烈的背景吸收。因此，在某些情況下，拉曼是不錯(cuò)的選擇。與占主導(dǎo)地位的瑞利散射相比，拉曼散射非常弱。為了獲得合理的信噪比，通常需要幾秒鐘的長(zhǎng)積分時(shí)間。這對(duì)于常規(guī)光譜學(xué)來(lái)說(shuō)可能不是問(wèn)題，但對(duì)于光譜成像來(lái)說(shuō)，可能需要幾個(gè)小時(shí)才能得到一個(gè)視野。為了增強(qiáng)信號(hào)，多年來(lái)已經(jīng)開發(fā)了幾種不同的方法。基于質(zhì)子的方法，如表面增強(qiáng)拉曼光譜，進(jìn)一步降低檢測(cè)極限到單分子水平 ...

束水平放置以激發(fā)相同的點(diǎn)，或彼此非常接近的點(diǎn)(圖2，頂部)。在所有使用DOE的實(shí)驗(yàn)中，我們確保每個(gè)小束都有足夠的功率，能夠充分激發(fā)熒光團(tuán)。在比較單束和五束成像模式的實(shí)驗(yàn)中，我們將DOE保留在原位，并在兩種實(shí)驗(yàn)中生成5個(gè)小波束，它的區(qū)別是在單束實(shí)驗(yàn)中，我們簡(jiǎn)單地在中間成像平面放置一個(gè)簡(jiǎn)單的虹膜隔膜，作為四個(gè)小波束路徑上的屏障，只允許一個(gè)通過(guò))。在這些條件下，在800 nm處，單個(gè)中心光束對(duì)樣品的功率為24 mW，而所有五束光的功率之和對(duì)樣品的功率為108 mW，其他四束的平均功率為21 mW，每個(gè)都在平均值的5%以內(nèi)。檢鏡掃描與單光束雙光子光柵掃描成像相同，并使用放大光電倍增管(PMT)進(jìn)行檢測(cè) ...