短脈沖光進行激發(相對于樣品的壽命較短),然后直接(即通過門控檢測或脈沖采樣)或使用時間分辨電子技術記錄熒光分子的指數衰減如圖1(a)及1(b)。另外,頻域技術也可以測量熒光壽命如圖1(c)和1(d)。這里,激勵是連續的,隨著時間的推移,振幅調制為正弦波。熒光信號的相位和振幅隨激發波的變化而變化。通過繪制在一定調制頻率范圍內的相位變化,可以看到熒光團的相位延遲和振幅調制如圖1(d)。得到的熒光正弦信號可以在頻域解調,以量化熒光強度指數衰減引起的延遲。圖1FLIM常見的實現是使用一種稱為TCSPC的快速電子方法如圖1(a)。在TCSPC中,一個快速秒表測量一個激發光子和發射光子。這個時間定義了每 ...
拉曼顯微鏡的激發需要(至少)兩個激光波長,其中一個波長必須是可調的,以匹配分子振動頻率的差頻。此外已經證明,用幾皮秒的激光脈沖寬度激發CARS和SRS可以理想地平衡高效生成非線性信號所需的高峰值功率與相對狹窄的光譜帶寬(<1 nm)的要求,以匹配分子振動的固有線寬。對于高速成像,至少需要10Mhz的重復頻率,理想情況下應該更高。這是因為在視頻速率成像中,數據是以每秒1000萬像素的速度獲取的,并且CARS至少需要每個像素發射一個激光(對于帶有調制傳輸檢測的SRS至少需要兩個激光)。此外,近紅外光譜區域的激光激發已被證明能較大限度地減少CARS中非共振背景的產生,與可見光激發相比,提供了減 ...
在短時間內被激發到更高的能級。電子將經歷振動弛豫到激發態的最低振動水平(記為S1),這是一種稱為內轉換的非輻射過程。從S1電子態,分子通過輻射或非輻射過程回到基態。圖1表示了在這些能級中發生的不同發光現象。熒光是分子(熒光團)通過發射可檢測的光子(時間尺度為)衰減到基態的輻射過程。熒光發射發生在激發電子能級最低的位置(S1)。這種來自最低激發電子能級的強制發射確保了發射光譜保持不變,并且與激發波長無關。由于振動弛豫和內部轉換中的能量損失,發射的熒光光子的能量較低(即發射發生在比激發更長的波長)。這種發射波長的位移稱為斯托克斯位移。另一個主要發光過程,磷光,通過被稱為系統間交叉(ISC)的過程發 ...
光分子因為受激發射而產生熒光信號,接著繼續照射使這些發光的熒光分子產生漂白, 在下一輪不能被激發光再次激活。之后交替使用405nm和561nm激光來進行激活,激發和漂白其他的熒光分子。往復循環,直至全部完成稀疏標記的細胞成像。圖1展示了使用光激活定位顯微技術PALM 定位單個熒光分子最后實現超光學衍射極限分辨率成像的示意圖。PALM的成像方法只能觀察基于細胞外源表達的蛋白質。圖1.PALM超分辨率顯微成像系統原理及示意圖PALM超分辨系統系統部分組成及光路結構:(1)倒置熒光顯微鏡:可以用于激光掃描共焦顯微成像或者單分子PALM顯微成像。(2)半導體激光:405nm激光器作為激活光,561nm ...
,由于相干受激發射過程[1]能產生約103-105倍的增強拉曼信號,可以實現高達視頻速率(約25幀/s)[2]的高速成像。SRS顯微鏡繼承了自發拉曼光譜的優點, 是一種能夠快速開發、label-free的成像技術,同時具有高靈敏度和化學特異性[3-6], 在許多生物醫學研究的分支顯示出應用潛力,包括細胞生物學、脂質代謝、微生物學、腫瘤檢測、蛋白質錯誤折疊和制藥[7-11]。特別的是,SRS在對新鮮手術組織和術中診斷的快速組織病理學方面表現出色,與傳統的H&E染色幾乎完全一致[12,13]。此外,SRS能夠根據每個物種的光譜信息,對多種組分的混合物進行定量化學分析[6,7,14]。盡管在 ...
可重復的單擊激發·內部傳感器評估和過程控制·自動搜索和調整沖擊力·位置的變化是自動預測的·通過附件配置脈沖特性·通過遠程控制或集成到客戶系統中來觸發功能·在德國設計和組裝·CE認證1.確保單次激發雙重撞擊激勵可以在時域和頻域檢測到2.豐富的配件支持不同的傳感器-尖端-配重的組合。綜述上文介紹WaveHitMAX - 一款用于全自動沖擊測試的智能脈沖錘,在全新的AI智能脈沖領域實現真正意義上的全自動智能脈沖錘!關于Gfai techGfai tech GmbH一直在生產和銷售"德國制造"的聲音和振動測量和分析創新產品超過15年。作為應用計算機科學促進會(GFai)的100%子 ...
下。通過增加激發光的強度來增加熒光燈的數量是不可行的,因為這會傷害魚類。圖2 HiCAM高速像增強熒光相機附在熒光顯微鏡上實驗裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統的熒光顯微鏡對斑馬魚進行研究(圖2)。將魚固定在凝膠中,從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細胞中發出。這種光向各個方向發射,其中一些光以相反的方向穿過激光的光路。但是,熒光通過二色鏡被定向到相機上,而不是被反射回光源。任何散射的激發光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細胞熒光發出波長的光。圖像傳感器將捕捉進來的熒光。捕捉將以每秒數百或數千幀的幀率下進行,每幀的曝光時間數量級在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子 ...
體中載流子的激發和復合等。正是由于這個緣故,在飛秒激光誕生后的相當長的一段時間內,飛秒激光主要是用來研究物理、化學領域微觀過程超快現象的一個技術,從而在物理、化學和生物領域完成了大量的超快過程的研究,發現了大量的新的超快現象,解釋了大量原子、分子微觀運動規律,成為多個基礎學科研究領域中相當引人矚目并獲得累累成果的研究方向。二、飛秒激光的功率飛秒激光的峰值功率是指脈沖持續時間內所具有的瞬時功率,即E/r,E為飛秒脈沖包絡內所攜帶的能量,r為飛秒脈沖包絡的j大值一半所應對的時間寬度。由于r為極短的10-15s量級,即使其攜帶的能量為毫焦耳量級(10-3J),其峰值功率也高達1012W(TW,太瓦) ...
)激光器進行激發。由于可見或近紅外激光器的波長更短,拉曼顯微鏡的空間分辨率可以達到亞微米級。另一方面,紅外光的波長為幾微米。對于許多顯微鏡的應用來說,其空間分辨率被認為是很差的。2)水在紅外區域有強烈的吸收。對于富含水的環境(如生物樣品),紅外光會受到強烈的背景吸收。因此,在某些情況下,拉曼是不錯的選擇。與占主導地位的瑞利散射相比,拉曼散射非常弱。為了獲得合理的信噪比,通常需要幾秒鐘的長積分時間。這對于常規光譜學來說可能不是問題,但對于光譜成像來說,可能需要幾個小時才能得到一個視野。為了增強信號,多年來已經開發了幾種不同的方法?;谫|子的方法,如表面增強拉曼光譜,進一步降低檢測極限到單分子水平 ...
束水平放置以激發相同的點,或彼此非常接近的點(圖2,頂部)。在所有使用DOE的實驗中,我們確保每個小束都有足夠的功率,能夠充分激發熒光團。在比較單束和五束成像模式的實驗中,我們將DOE保留在原位,并在兩種實驗中生成5個小波束,它的區別是在單束實驗中,我們簡單地在中間成像平面放置一個簡單的虹膜隔膜,作為四個小波束路徑上的屏障,只允許一個通過)。在這些條件下,在800 nm處,單個中心光束對樣品的功率為24 mW,而所有五束光的功率之和對樣品的功率為108 mW,其他四束的平均功率為21 mW,每個都在平均值的5%以內。檢鏡掃描與單光束雙光子光柵掃描成像相同,并使用放大光電倍增管(PMT)進行檢測 ...
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