:(1)倒置熒光顯微鏡:可以用于激光掃描共焦顯微成像或者單分子PALM顯微成像。(2)半導體激光:405nm激光器作為激活光,561nm激光器作為激發(fā)光,激光器波長的選擇是要和使用的光活化蛋白的特性有關(guān),用于激發(fā)熒光的激光器波長一般包括488、561、594、635nm。激光器功率一般在50-200mW。為了光路調(diào)節(jié)的方便,一般要求激光器輸出光斑質(zhì)量要好。(3)自由空間或光纖多波長耦合器:自由空間耦合器可以使得更高功率的激發(fā)和激活激光進入顯微鏡系統(tǒng),使得成像過程可以更快。(4)快門或AOTF(Acousto-Optic Tunable Filter聲光可調(diào)濾波器):快門或AOTF的作用是切換激 ...
熒光相機附在熒光顯微鏡上實驗裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統(tǒng)的熒光顯微鏡對斑馬魚進行研究(圖2)。將魚固定在凝膠中,從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細胞中發(fā)出。這種光向各個方向發(fā)射,其中一些光以相反的方向穿過激光的光路。但是,熒光通過二色鏡被定向到相機上,而不是被反射回光源。任何散射的激發(fā)光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細胞熒光發(fā)出波長的光。圖像傳感器將捕捉進來的熒光。捕捉將以每秒數(shù)百或數(shù)千幀的幀率下進行,每幀的曝光時間數(shù)量級在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子倍增CCD (EMCCD)傳感器的光靈敏度足以捕捉到微弱的熒光。但它們在全分辨率下只能實現(xiàn)大約10 ...
間的串擾,在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標記樣品具有挑戰(zhàn)性,而在共振增強SRS成像中,多探針標記可以擴展到數(shù)十個不同的探針。就多重成像而言,這種能力是一個巨大的勝利,因為許多細胞生物學研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細胞內(nèi)的過程和途徑。通過共振增強SRS提供的多路復用能力可以進一步推動到更低的探針濃度。通過讓探針選擇性僅由SRS激發(fā)過程決定,原則上可以放寬檢測端的帶寬。這意味著在拉曼躍遷之后,分子可以在第②步中被激發(fā)到發(fā)射電子狀態(tài),允許通過熒光發(fā)射有效地檢測發(fā)色團。如果電子躍遷以成功的拉曼躍遷為條件,則可以根據(jù)其狹窄的拉曼帶選擇發(fā)色團,同時通過熒光檢測策略提高探測靈敏度。這一過程被稱為受激 ...
105。然而熒光顯微鏡技術(shù)可以捕捉到來自單個分子的信號,即使是敏感的CRS方法也需要成千上萬個目標分子來產(chǎn)生可檢測的信號。因此,關(guān)注提高靈敏度是擴大CRS技術(shù)使用的重要策略。CRS成像的對比度來源于分子化合物的振動特征。對于內(nèi)源性分子,這種標記的數(shù)量是有限的。大量的物種和有限數(shù)量的振動特征的結(jié)合導致了重疊帶結(jié)構(gòu)的密集光譜。在這種背景下識別單個物種構(gòu)成了振動光譜學的基本挑戰(zhàn)。因此,提高CRS分子特異性的方法有機會使該技術(shù)得到更廣泛的應(yīng)用。上述這三個性能目標,高光譜成像速度,靈敏度和分子特異性,在過去十年中,已成為CRS顯微鏡領(lǐng)域發(fā)展的重要動力。更多詳情請聯(lián)系昊量光電/歡迎直接聯(lián)系昊量光電關(guān)于昊量 ...
于廣泛應(yīng)用于熒光顯微鏡的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人們追求的目標,盡管目前取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的開發(fā)仍然是該領(lǐng)域的熱點。與腈相比,炔標記提供了兩倍以上的信號強度,并且根據(jù)炔在生物分子中的定位,其拉曼信號漂移——末端炔出現(xiàn)在約2100 cm?1處,內(nèi)部炔出現(xiàn)在約2200 cm?1處——如果選擇適當?shù)臉擞浂ㄎ唤M合,就可以對不同的炔標記分子進行多路成像。由于這些原因,炔標記是目前應(yīng)用廣泛的拉曼標記策略,并已被用于研究脂類、蛋白質(zhì)、糖和核苷酸。如果您對拉曼光譜成像有興趣,請訪問上海昊量光電的官方網(wǎng)頁:http://www.arouy.cn/thr ...
Bleedthrough還是Crosstalk,這是一個問題以下三張放大40倍圖片是FITC標記的肌動蛋白和Cy3標記線粒體,并使用Lumencor SPECTRA X八通道LED顯微鏡光源對兩種熒光染料進行激發(fā),用于顯示Bleedthrough和crosstalk的不同表現(xiàn)以及不同的解決方案。圖1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激發(fā),485/25濾光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四帶通多邊分束器和發(fā)射濾光片在這幅圖像中同時存在bleedthrough和crosstalk現(xiàn)象。Bleedthrough表現(xiàn)為圖像中細胞外灰度相對較高(對比圖2,已消除bleed ...
A光引擎通過熒光顯微鏡觀察水質(zhì)中藍藻和綠藻的快速方法。當我們分析水華的成分時,熒光顯微鏡比DIC相位顯微鏡更加合適。熒光顯微鏡可以利用水華細胞中的色素或熒光染料來區(qū)分不同的藻類種類,而DIC相位顯微鏡可以顯示細胞樣品的細微結(jié)構(gòu)和凹凸變化,不太方便區(qū)分不同的藻類,當然如果需要分辨的藻類有明顯的形態(tài)以及結(jié)構(gòu)方面的差異同樣也可以使用。而熒光顯微鏡可以利用特定的熒光探針來檢測水華細胞中的毒素或營養(yǎng)物質(zhì),從而評估水華的危害性和生理狀態(tài)。DIC相位顯微鏡雖然可以顯示細胞的三維立體影像,但對于透明或折射率差異小的樣品,其對比度和分辨率較低。對藍藻和綠藻而言,綠藻主要含有葉綠素,可以用藍光有效地激發(fā)。藍藻含有 ...
然后通過延時熒光顯微鏡監(jiān)測20小時(圖1B)。為了使GFP熒光真實地展現(xiàn)蛋白質(zhì)表達水平,穩(wěn)定且可重復的激發(fā)光源至關(guān)重要,這使得SOLA光引擎成為該應(yīng)用的理想高性能照明光源,并且低熱量與低噪聲也便于獲得更加優(yōu)質(zhì)的圖像信息。除了表征起效時間和蛋白表達速率的顯著細胞間變異性(圖1)外,LISCA還用于確定血清蛋白對不同mRNA-脂質(zhì)復合物制劑的細胞攝取的影響。圖1:(A)單個GFP表達的HuH7細胞排列在微圖纖連蛋白上。(B)代表GFP表達的單細胞熒光軌跡。灰色陰影區(qū)域表示mRNA -脂質(zhì)復合物培養(yǎng)的zui初1小時。(C) 是(B)的放大區(qū)域,顯示細胞間蛋白表達起效的變異。根據(jù)知識共享署名許可條款, ...
低分辨率。在熒光顯微鏡中,視野中的任何染料分子都會受到刺激,包括離焦平面中的染料分子。共聚焦顯微技術(shù)利用共聚焦系統(tǒng)有效地排除了焦面以外光信號的干擾,提高了分表率,實現(xiàn)了光學切片。目前,共聚焦顯微成像技術(shù)是生物醫(yī)學領(lǐng)域非常重要的分析工具,借助該技術(shù),研究人員能夠?qū)毎械奶囟ǔ煞诌M行光學切片和三維(3D)重建。自20世紀60年代引入柔性胃腸(GI)內(nèi)窺鏡檢查以來,內(nèi)窺鏡成像技術(shù)不斷取得進步。在過去的幾十年中,內(nèi)窺鏡已被用于以微創(chuàng)或無創(chuàng)的方式觀察空腔內(nèi)部或人體內(nèi)部器官的表面,以進行診斷或手術(shù)。目前臨床上常用的白光和窄帶光內(nèi)窺鏡無法達到細胞水平的分辨率,因此無法實現(xiàn)光學活檢,嚴重降低了診斷的準確性。 ...
它們是對現(xiàn)代熒光顯微鏡、投影系統(tǒng)或激光系統(tǒng)的光學設(shè)置的補充。由于在光學系統(tǒng)中用非球體代替球面鏡,具有系統(tǒng)縮小的特殊優(yōu)勢,可以額外減輕重量,這在航空航天領(lǐng)域起到了決定性的作用。例如,通過減輕重量,在發(fā)送地球觀測衛(wèi)星時可以降低燃料消耗。球面VS非球面zui后對比非球面鏡在成像質(zhì)量方面明顯占優(yōu)勢,但這仍然反映在較高的生產(chǎn)/測量工作上,因此與球面鏡相比成本較高。然而,這被單個透鏡的節(jié)省所抵消了。下表顯示了兩種透鏡幾何形狀的比較。上海昊量光電作為Asphericon在中國大陸地區(qū)的代理商,為您提供專業(yè)的選型以及技術(shù)服務(wù)。對于非球面透鏡以及非球面光束整形鏡有興趣或者任何問題,都歡迎通過電話、電子郵件或者微 ...
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