使用空間散射偏移拉曼光譜檢測豬肉中β-激動劑的優勢β-激動劑殘留在家畜體內半衰期長、代謝慢、穩定性差,對人類健康存在潛在風險。如果給畜禽大量喂食沙丁胺醇,大部分會沉積在動物的肝、腎、肺、肌肉等組織和器官中,人類食用會對肝、腎等內臟器官產生毒副作用,嚴重影響健康。高效液相色譜(HPLC)、液相色譜-質譜(LC-MS)、氣相色譜-質譜(GC-MS) 、酶聯免疫吸附(酶聯免疫吸附)和毛細管電泳(CE) 等色譜方法已廣泛應用于動物飼料和組織中β-激動劑的測定。這些方法可能具有較高的敏感性和特異性。然而,它們通常耗時、勞動密集、具有破壞性,并且需要進行預處理,這使得實時監測肉類中β-激動劑的殘留變得困難 ...
模擬受激拉曼散射顯微鏡拉曼效應是由C.V.拉曼在20世紀20年代發現。它是一種廣泛使用的光譜方法來確定分子的振動模式。與其他分析化學方法相比,光譜方法提供了高空間分辨率。不需要直接接觸就可以獲得化學信息。振動光譜提供了合理的化學特異性,而不需要額外的標簽。然而,自發拉曼效應是一個弱散射過程。對于成像和顯微鏡的應用來說,獲得一個視場可能需要幾個小時的信號整合時間。因此,相干拉曼散射方法,如刺激拉曼散射效應,現在被廣泛用于拉曼成像。在這個應用說明中,我們將描述Moku:Lab的鎖相放大器是如何在波士頓大學的刺激拉曼成像裝置中實現的。介紹拉曼光譜是一種非破壞性的分析化學技術。它直接探測樣品的振動模式 ...
一.簡介拉曼散射光譜為生物分子的特異性檢測和分析提供了化學鍵的固有振動指紋。那么什么是受激拉曼散射顯微鏡?受激拉曼散射(SRS)顯微技術是一種相對較新的顯微技術,是一種相干拉曼散射過程,允許使用光譜和空間信息進行化學成像[18],由于相干受激發射過程[1]能產生約103-105倍的增強拉曼信號,可以實現高達視頻速率(約25幀/s)[2]的高速成像。SRS顯微鏡繼承了自發拉曼光譜的優點, 是一種能夠快速開發、label-free的成像技術,同時具有高靈敏度和化學特異性[3-6], 在許多生物醫學研究的分支顯示出應用潛力,包括細胞生物學、脂質代謝、微生物學、腫瘤檢測、蛋白質錯誤折疊和制藥[7-11 ...
回光源。任何散射的激發光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細胞熒光發出波長的光。圖像傳感器將捕捉進來的熒光。捕捉將以每秒數百或數千幀的幀率下進行,每幀的曝光時間數量級在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子倍增CCD (EMCCD)傳感器的光靈敏度足以捕捉到微弱的熒光。但它們在全分辨率下只能實現大約100fps的幀率,這對于目前的應用來說是不夠的。而CMOS傳感器可以在更高的幀率下工作,在全分辨率下可達每秒數千幀。然而,在每幀較短的曝光時間內,普通的高速CMOS傳感器無法記錄足夠的光量來達到合理的信噪比。圖3 斑馬魚心臟中(圖像右下角)的紅細胞從一個腔室被運送到下一個腔室(1-3),并進 ...
作用的湯姆遜散射效應,可以產生相干的硬X射線,波長達0.4?。飛秒強激光與惰性氣體原子相互作用而引發的高次諧波,可獲得軟X波段的相干輻射,波長可覆蓋十納米至幾納米。飛秒激光在晶體中的二倍頻、四倍頻、六倍頻效應可將近紅外的飛秒激光變換至可見、紫外、極紫外和真空紫外,直至150nm,與高次諧波的軟X波段相接。利用飛秒激光在晶體中的參量振蕩和參量放大過程中,可以在近紅外,甚至紅外波段實現寬頻譜范圍的調諧。除此之外,利用飛秒激光在非線性介質中的傳輸,可以發生自相位調制,四波混頻,孤子自頻移和超連續等多種非線性效應,這些效應都可以使飛秒激光器輸出的光脈沖從單一波長變換到紫外至紅外波段。特別值得提出的是, ...
射線有吸收和散射作用,從而引起射線能量的衰減。射線在物質中的衰減是按照射線強度的衰減是呈負指數規律變化的,以強度為I的一束平行射線束穿過厚度為δ的物質為例,穿過物質后的射線強度為:I=Ie式中I—-射線透過厚度δ的物質的射線強度;I—-射線的初始強度;e—-自然對數的底;δ—-透過物質的厚度;μ—-衰減系數(㎝)。射線無損測試缺陷自動檢測系統的硬件組成與結構如圖1所示。系統主要由三個部分組成:信號轉換部分、圖像處理部分及缺陷位置的獲取與傳輸部分。圖2 探測器外觀圖圖3 檢測系統示意圖信號轉換部分主要由X光光源、檢測樣品、傳送車、線陣相機組成,信號轉換部分的主要功能是完成從x射線到可見光的信息載 ...
一種相干拉曼散射(CRS)過程,其激發條件與共振CARS相同。與自發拉曼散射不同,在自發拉曼散射中,樣品被一個激發場照亮,SRS中兩個激發場在泵浦頻率ωp和斯托克斯頻率ωs處重合在樣品上。如果激發束的差頻Δω = ωp?ωs與焦點內分子的振動頻率Ω相匹配,即分子躍遷由于分子躍遷的刺激激發,速率提高。分子居群從基態通過虛態轉移到分子的振動激發態(圖1A)。這與自發拉曼散射相反,自發拉曼散射從虛態到振動激發態的轉變是自發的,導致信號弱得多。圖1.受激拉曼散射原理(A) SRS的能量圖。泵浦和斯托克斯束的共同作用通過虛態有效地將樣品中的分子從基態轉移到第一振動激發態。被激發的振動狀態可以通過調節泵和 ...
偽與自發拉曼散射相比,CRS技術可以產生更強的振動敏感信號。CRS技術在光學顯微鏡中的普及與這些大大提高的信號水平密切相關,這使CRS顯微鏡的快速掃描能力成為可能。然而,除了更強的振動信號之外,相干拉曼相互作用還提供了豐富的探測機制,用于檢查各種各樣的分子特性。一般來說,CRS技術比自發拉曼技術對介質的拉曼響應提供了更詳細的控制。所以在實際搭建相干拉曼系統時,會有諸多問題。當第①次構建CARS或SRS顯微鏡時,很難確定PMT或鎖相放大器探測器上觀察到的信號的來源。然而,可以使用一個簡短的檢查表來驗證信號的身份。通常情況下,應使用強諧振樣品(例如,兩個蓋卡片之間的一層薄十二烷),并對樣品施加較大 ...
相干拉曼技術雙束光同步的粗調與細調方法對于相干拉曼技術,兩束激光必須在時間和空間上結合。常用的方法是使用二向色鏡和幾個轉向鏡進行精細調整,在空間上重疊光束相對簡單。通常情況下,在組合光束路徑中間隔約1米的兩個光闌處的重疊可用于驗證空間對準。可根據CARS或SRS信號強度進行微調?;趏po的系統中的時間重疊是通過基于反向反射器的被動延遲階段來實現的,該延遲階段允許在保持空間對齊的同時調整兩個光束中的一個的路徑長度(圖1)。由于使用的激光系統的重復頻率通常是80 MHz,兩個脈沖之間的時間周期是p = 1/f = 12.5 ns。用這個周期乘以光速,得到距離約為3.75 m。因此,為了找到時間重 ...
相干拉曼技術中常用的掃描方案掃描有兩種常用的方法:樣品掃描和光束掃描。樣品掃描提供了一個簡單的設備,但通常較低的速度和較小的視野,而光束掃描更復雜的實現,對光學系統的性能要求更高,但提供了更大的視野和更高的成像速度。在樣品掃描中,整個相干拉曼光學設置是固定的,樣品相對于焦點平移。這意味著光學系統可以對準一個固定的激光束,這比在一系列可能的激光束位置上對準系統更容易。為了獲得高的空間分辨率,需要一個平移階段具有較高的精度和重復性要求。通常,采用壓電驅動的彎曲級。這些階段提供的步長和重復性遠遠超過光學顯微鏡(通常小于5 nm)和較大數百微米的平移所要求的。這種制度主要有兩個缺點:一是圖像的較大視場 ...
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